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詳細介紹 - 套組原理
圖一 套組內抗壞血酸標準品檢量線。總抗氧化能力(Total Antioxidant Capacity, TAC)可代表體內抗氧化的能力。抗氧化物在防止自由基和其他潛在有毒氧化物質的形成和清除中扮演重要的作用。抗氧化物可分為三類:酵素系統(GSH reductase, catalase, peroxidase等),小分子(ascorbic acid, uric acid, vitamin E等)和蛋白質(albumin, transferrin等)。不同的抗氧化物的抗氧化能力各有不同。檢測檢體中的TAC比單獨測量某一抗氧化物更能反應檢體在生理環境中的抗氧化狀態。而研究顯示,在癌症、糖尿病及心肌梗塞的病人中,TAC都顯著較正常人低,證明了氧化壓力是造成疾病的重要原因。本套組的測量結果,可直接反應檢體中活性氧化物(reactive oxygen species, ROS)的影響程度、抵抗氧化損傷和氧化相關疾病的狀態。
經由移除GSH與蛋白質訊號干擾,本套組可單獨測量小分子抗氧化物所呈現的抗氧化力,透過小分子抗氧化物將Fe3+還原成Fe2+。而還原後的Fe2+與呈色劑螯合,在595 nm光譜附近產生強烈的吸收光譜變化(OD595)而可對其進行定量檢測。經由比較檢體的與抗壞血酸標準品的OD595,檢體中的TAC值可用抗壞血酸的抗氧化能力當量值(ascorbic acid equivalents)來表示。本套組可使用96孔盤,搭配微量孔盤檢測儀(microplate reader);或是選用0.5 mL薄壁離心管,搭配建議之專用光譜儀進行測量,其操作方式請參閱使用步驟。
圖二 總抗氧化力換算範例。
(A). 同次分析的結果可以OD 570讀值呈現。
(B). 將樣品的總抗氧化力以抗壞血酸當量值呈現,以便進行不同試驗間的比較。(樣品濃度經過稀釋後檢測,最後還原呈現。)